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技術(shù)原理

   CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是最新出現(xiàn)的一種由sgRNA指導Cas核酸酶對靶向基因進行特定DNA修飾的技術(shù)。在這一系統(tǒng)中，sgRNA引導序列靶定位點剪切雙鏈DNA達到對基因組DNA 進行修飾的目的。CRISPR/Cas9系統(tǒng)能夠?qū)π∈?/span>基因組特定基因位點進行精確編輯，目前瑞思元已經(jīng)成功將此技術(shù)應用于小鼠基因敲除/敲入模型制備，以及條件性敲除（Loxp系統(tǒng)）模型制備。      

      目前瑞思元采取優(yōu)化過的野生型Cas9和雙切口Cas9n（Optimized Cas9 System,OCAS and OCASn）。采用優(yōu)化過的雙切口Cas9n(OCASn)可以將脫靶效應降到最低。

常規(guī)基因敲除小鼠

 應用sgRNA-Cas9的方法對小鼠所有組織和細胞中的目的基因中全部外顯子或某些重要的外顯子或者結(jié)構(gòu)功能域進行敲除，得到目的基因表達沉默的小鼠。

運用

研究目的基因（完全性敲除后非致死性）對全身生理的功能，

可用于自發(fā)性大/小鼠疾病模型的建立，研究疾病致病機制和疾病治療的藥物研發(fā)；

技術(shù)優(yōu)勢

      研發(fā)周期短（2-3個月），敲除效率高；

      可實現(xiàn)多基因同時敲除；

      打破對小鼠遺傳品系的限制，可以實現(xiàn)不同遺傳背景或在已有基因修飾小鼠模型基礎(chǔ)上進行基因編輯；

制備流程

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